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細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無(wú)菌、適宜溫度、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等），使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。主要有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、植物細(xì)胞培養(yǎng)、微生物細(xì)胞培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù)，通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)既可以獲得大量細(xì)胞，又可以借此研究細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞的合成代謝、細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖等。
目的：建立一套適用的培養(yǎng)操作規(guī)程，進(jìn)行無(wú)污染條件下體外細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)。
操作步驟：
1、紫外燈照射超凈工作臺(tái)30分鐘（根據(jù)實(shí)際情況，可適當(dāng)延長(zhǎng)或縮短照射時(shí)間，但時(shí)間長(zhǎng)一點(diǎn)總比時(shí)間短一點(diǎn)安全。）
2、將培養(yǎng)液、PBS、胰酶放在37℃水浴中溫育（每次用多少，溫育多少，這樣既可節(jié)約溫育的時(shí)間，又可延長(zhǎng)藥品的使用期限。）
3、超凈工作臺(tái)照射30分鐘后，關(guān)閉紫外，打開(kāi)照明，打開(kāi)排風(fēng)10分鐘后再次進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)室。（注意：要打開(kāi)排風(fēng)10分鐘后再進(jìn)行操作，這樣才能保證循環(huán)的風(fēng)是無(wú)菌的。同時(shí)還會(huì)避免有菌的風(fēng)直接吹到人的呼吸道中，對(duì)人體也有一定的保護(hù)作用）
4、戴上kouzhao及手套（有條件的**好戴上帽子，不過(guò)也沒(méi)關(guān)系，我們實(shí)驗(yàn)室就沒(méi)戴）
5、用70-75%的酒精擦試實(shí)驗(yàn)物品，然后拿入超凈工作臺(tái)中。
6、操作時(shí)注意以下幾點(diǎn)：盡量在酒精燈火焰附近操作，但如果管子里有細(xì)胞就要離火焰有一定距離了，否則細(xì)胞要燙死了；不要重復(fù)使用移液管（即吸一次后，就換新的管）；不要在敞開(kāi)的容器上方操作；手上的酒精不要擦太多，否則靠近酒精燈時(shí)容易把手燒到（我想很多人都有過(guò)被燒的經(jīng)歷吧）；
其實(shí)操作是很簡(jiǎn)單的，但一定要仔細(xì)。尤其是第2步許多人都不注意，細(xì)胞平時(shí)放在37℃培養(yǎng)，如果加入的PBS或胰酶溫度太低，會(huì)對(duì)細(xì)胞有操傷的，雖然這種損傷短期內(nèi)察覺(jué)不到，但時(shí)間長(zhǎng)了，就會(huì)顯現(xiàn)出來(lái)。
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